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激酶重组蛋白在信号转导中的主要作用是什么?

  • 发布日期:2022-06-21      浏览次数:83
    •   重组蛋白表达是将目的基因通过电转化或者热激等手段转入合适的宿主中,利用宿主的特定生理、生化和遗传特点进行目标蛋白大量表达及纯化的生物技术。
        激酶重组蛋白是一类催化蛋白质磷酸化反应的酶。它能把腺苷三磷酸上的γ-磷酸转移并共价结合到特定蛋白质分子中某些丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基上,从而改变底物蛋白质及激酶的构象和活性。蛋白激酶内都存在一个同源的由约270个氨基酸残基构成的催化结构区。在细胞信号传导、细胞周期调控等系统中,各种蛋白激酶形成了纵横交错的网络,在细胞的生命活动中起了广泛的作用。
        激酶重组蛋白可聚集成组、家族和亚家族,伴随序列相似性和生物化学功能的增加。激酶进化树图显示出这些催化区之间的序列相似性:两个激酶间沿分支的距离与两个序列间的差异成正比。已经标记七种主要组别,并用不同颜色进行区分。在信号转导中主要作用有两个方面:其一是通过磷酸化调节蛋白质的活性,磷酸化和去磷酸化是绝大多数信号通路组分可逆激活的共同机制,有些蛋白质在磷酸化后具有活性,有些则在去磷酸化后具有活性;其二是通过蛋白质的逐级磷酸化,使信号逐级放大,引起细胞反应。
        激酶重组蛋白的两种检测方法如下:
        放射性同位素法:
        使用放射性同位素方法有诸多优点:它是直接检测的方法,放射性同位素的灵敏度很高,测试结果非常准确,被认为是蛋白激酶生化活性检测的“金标准”。因此,至今还有很多人继续使用放射性同位素作为检测激酶活性的方法。放射性同位素方法主要有膜过滤法和接近闪烁计数法两类。
        非均相非放射性同位素法:
        由于放射性同位素存在上述一些缺点,科学家们开发了众多的非放射性激酶检测方法,包括酶联免疫法、高效液相色谱法、质谱法、核磁共振波谱法、毛细管电泳等。
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