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组织活性蛋白的提取流程

  • 发布日期:2022/6/2      浏览次数:16
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    详细介绍:

        活性蛋白是一种复杂的有机化合物。组成蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子,每一条多肽链有二十至数百个氨基酸残基不等;各种氨基酸残基按一定的顺序排列。它可以从源头直接参与皮肤细胞的基因表达与生理信号的传递,修复细胞,阻断老化,也可以直接营养肌肤,提高肌肤自身的调节能力,立体构建和维护皮肤的生态环境,实现逆龄护肤。

      活性蛋白在生产过程中不经过高温过程和特定化学处理方式,采用只切除蛋白的端太技术,保持蛋白的三螺旋结构从而保持其生物活性。水解蛋白生产过程中需经过高温蒸煮等高温工艺,加上用蛋白酶(复合酶)处理,破坏了蛋白质的空间结构(三螺旋结构),从而使其丧失了生物活性,同时复合酶的处理虽然能将肽链切成分子量在一定范围内的多肽分子,但是多肽分子间氨基酸组成和排列方式却有很大差异。
      组织活性蛋白的提取流程:
      1.提取液制备:每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
      2.取100mg组织样本剪碎,加入蛋白提取液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
      3.将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
      4.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到活性蛋白样品。
      5.将蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

     
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