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导致活性蛋白质“失活”的原因是什么?

  • 发布日期:2021-06-18      浏览次数:1030
    •    活性蛋白质为生物活性蛋白,仅用于体外研究,请根据实验室标准操作流程使用,本品不具传染性。两周内可存放于2~8℃,如需长期保存请分装后置于-20℃,避免反复冻融。
        在各种条件下使用不同操作方法从细胞环境中提取蛋白质将会导致其活性的丢失和结构的改变。这些操作包括稀释,改变溶液条件,暴露于各种降解酶、氧气、重金属及各种材料的表面,以及生理条件的变化(如冻融作用)等。意识到这其中的任何—个情况都有可能影响蛋白质、了解可能采取的尽量减少这些影响的预防措施,都将有助于确保一个纯化草案的成功。如果在任何操作过程中发生目标蛋白质的丢失或失活,那么在确定这种情况发生的原因时将通常会提出一个简单的解决方案。因此,如果可能的话,检查蛋白质失活是否伴随着蛋白质的损失或其结构的变化,或者是否蛋白质仍然存在,但已失活。这些不同可能性之间的区别可能表明了什么类型的操作过程是失活背后的问题,因此也指明了一个适当的解决方案是什么。
        常规处理方法上显然要保持蛋白质的稳定,应避免可以使其变性的处理方法。因此,蛋白质溶液一般不要剧烈搅拌或涡旋,因为这可能会导致蛋白质氧化或表面变性。蛋白质溶液不应暴露于严峻的pH、高温、有机溶剂或任何其他可能促进变性的条件。同样如果在解冻的状态下长时间储存一种蛋白质溶液,细菌和真菌的生长将会成为一个问题。在这样的情况下,无菌溶液和抗菌或抗真菌试剂可能是必要的。最后使用蒸馏水配制将与蛋白质接触的所有溶液,并且要将蒸馏水储存在无藻类生长的容器中。
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