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pLH-sgRNA1-boxB-MS2-PP7基因编辑质粒

pLH-sgRNA1-boxB-MS2-PP7基因编辑质粒

简要描述:
pLH-sgRNA1-boxB-MS2-PP7基因编辑质粒
别名Plasmid #75397
启动子U6
复制子pUC
克隆菌株DB3.1
培养条件37度
质粒宿主哺乳细胞,慢病毒
质粒用途基因编辑
片段类型CRISPR,sgRNA
原核抗性Amp
真核抗性Hyg,ccdB

更新时间:2021-06-17

访问量:35

厂商性质:生产厂家

生产地址:上海

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

442热激90s,再冰浴2min

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

66000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CSTF2-shRNA1(human)基因沉默质粒
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Tet-pLKO-Puro-CDC42-shRNA2(human)基因沉默,诱导质粒
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