质粒菌株库常用菌株—览表
BL21(DE3）该菌株用于高效表达克隆于有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。天然缺失外膜蛋白酶ompT和ATP依赖的蛋白酶Lon (La)，利于异源蛋白的表达。在培养皿上的生长时间约为10小时左右。ER2566该菌株用于高效表达克隆于有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。在培养皿上的生长时间约为10小时左右。
DH5a一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其80lacZIM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补，即可以用于蓝白斑显示。该菌株也缺失多种蛋白酶，在培养皿上的生长时间约为12小时左右。
JM101一种可支持带有琥珀突变的载体生长的宿主菌，在培养皿上的生长时间约为10小时左右。
JM109一种带有琥珀突变的载体生长的重组缺陷的抑制型菌株，对转染的DNA有修饰作用但无限制作用，在培养上的生长时间约为10小时左右。
HB101一种通常用于大规模制备质粒的抑制型菌株，它是一种转化效率很高的大肠杆菌K12×大肠杆菌B的杂交菌株,在培养皿上的生长时间约为10小时左右。
常用原核表达质粒一览表
质粒名称pRSET p24B11 pTYB pGEX pET pTRX-Fus pBV pMAL实验室系列数31462122启动子T7T7T7 PtacT7 PLPL Ptac大小(Kb)2.95.47.34.94.73.5/6.7抗性标记Ap Kan ApAp Kan ApAp Ap融合蛋白大小(kD)3-5 kD 0-1 kD 55 kD 26 kD 3-4 kD 11 kD/43 kD诱导物IPTG IPTG IPTG IPTG IPTG Trp 420C IPTG
如何提高目的蛋白在大肠杆菌中的表达量及可溶性表达?如何防止目的蛋白的降解?
融合蛋白的表达水平主要受目的蛋白影响、密码子不适、疏水性强、mRNA降解、或由于蛋白错误折叠而水解都可能造成表达水平低，可尝试不同的生长和表达条件来提高融合蛋白的表达量，低温诱导可降低包含体的形成及避免水解;运用最适密码子可提高表达;也可能由于目的蛋白对宿主细胞有毒性而使克隆不稳定。故表达时可利用丰富的培养基、新鲜的单菌落、低温诱导、低浓度的IPTG、减少诱导时间等条件来提高蛋白及可溶性蛋白的产量。蛋白酶抑制剂，蛋白酶缺陷的工程菌或者低温诱导可防止目的蛋白降解，纯化时为防止降解可使用变性条件，如6M脲等。
质粒菌株库pMAL纯化系统
pMAL-p2为分泌型表达载体，表达的融合蛋白分布于大肠杆菌外周腔，用冷渗透法即可获得较纯的融合蛋白。pMAL-c2表达的可溶性融合蛋白多位于大肠杆菌细胞质中，可按常规方法进行纯化。二者均为Ptac启动子，大小约为6.7Kb，不同的是pMAL-c2无malE信号序列。
大肠编辑质粒 pRE112/X7213
大肠编辑质粒 pKD46
大肠编辑质粒 pCP20
大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pwtCas9-bacteria #44250
大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pC001-huLshC2C2-MBP 79150
大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCas9 #42876
大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCAS #62225
大肠编辑质粒 pCAS配套质粒 pTargetF #62226
大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCRISPR #42875
哺乳编辑质粒
哺乳编辑质粒 pX260 #42229
哺乳编辑质粒 pX330 #42230
哺乳编辑质粒 pX335 #42335
哺乳编辑质粒 pX458 #48138
哺乳编辑质粒 pX459 #48139
哺乳编辑质粒 pX458M（+EZ-GuideXH）
哺乳编辑质粒 pX459M（+EZ-GuideXH）
EZ-GuideXH
哺乳编辑质粒 pX461 #48140
哺乳编辑质粒 pX552 #60958
哺乳编辑质粒 pX601 #61591
哺乳编辑质粒 pX602 #61593
哺乳编辑质粒 LentiCRISPR V2 #52961
哺乳编辑质粒 pLenti dCasVP64-Blast #61425
哺乳编辑质粒 pDD162 (Peft-3::Cas9 + Empty sgRNA) #47549
哺乳编辑质粒 pmCherry-C1-EGFP（CRISPR验证质粒）
哺乳编辑质粒 pY010 (pcDNA3.1-hAsCpf1) #69982
哺乳编辑质粒 addgene53189 ph7SK-gRNA
哺乳编辑质粒 pJ23sgRNA-eGFP 3
编辑质粒 酵母 Cas9-NAT酵母 #64329
编辑质粒 酵母 Cas9-NAT-kan酵母
编辑质粒 pdCas9-Tet1-CD #83340
哺乳报告基因质粒 pGL3-Basic
哺乳报告基因质粒 pGL3-Promoter
哺乳报告基因质粒 pGL3-enhancer
哺乳报告基因质粒 pGL3-Control
哺乳报告基因质粒 pRL-TK
哺乳报告基因质粒 pRL-SV40
哺乳报告基因质粒 pGL4.10[luc2]
哺乳报告基因质粒 pGL4.18[luc2PNeo]
自噬相关质粒 ptfhLC3B人
自噬相关质粒 ptfLC3大鼠
自噬相关质粒 HH-plasmid A1 pCDNA3.1(+)-3HA-hLC3B人
自噬相关质粒 慢病毒 plvx-GFP-LC3人
自噬相关质粒 HH-plasmid A1 pCDNA3.1(+)-hLC3B人
自噬相关质粒 pEGFP-LC3人
自噬相关质粒
自噬相关质粒
哺乳表达质粒 pCDNA3.0
哺乳表达质粒 pIRES2-zsGreen1
哺乳表达质粒 pTRACER-CMV3
哺乳表达质粒 pVAX1
哺乳表达质粒 pCEP4
哺乳表达质粒 pCEP4-CAT
哺乳表达质粒 pBudCE4.1
哺乳表达质粒 pBudCE4.1/lacZ/CAT
哺乳表达质粒 pTagBFP-N vector
哺乳表达质粒 p3XFLAG-CMV-7.1
哺乳表达质粒 pCS2 Notch1 Full Length-6MT（Plasmid #41728）
哺乳表达质粒 pMy-BirA-T2A-eGFP
哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-bFosVC155
哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-bJunVN173
哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-VC155
哺乳表达质粒 pBIFC-CC155
哺乳表达质粒 细胞自噬 pEGFP-LC3人
哺乳表达质粒 pCI-neo-GFP
哺乳表达质粒 pEYFP-Actin
哺乳表达质粒 FLAG-CMV-6a
哺乳表达质粒 pDsReD1-C1
大肠表达质粒 pGEX-4T-2
大肠表达质粒 pGEX-4T-3
大肠表达质粒 pKK233-2
大肠表达质粒 pSR43.6r
大肠表达质粒 pWUR702 53079
逆转录类质粒 逆病毒载体 pBABE-HA-puro
逆转录类质粒 逆病毒载体，荧光素酶 pBABE-LUC+
逆转录类质粒 逆转录病毒载体，LCNRNA LZRS-HOTAIR
逆转录类质粒 逆转录病毒载体，对照 LZRS-control
逆转录类质粒 逆转录病毒载体 pLEGFP-N1
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