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质粒菌株库

质粒菌株库

简要描述:
质粒菌株库常用菌株—览表以及质粒菌株库pMAL纯化系统,融合蛋白的表达水平主要受目的蛋白影响、密码子不适、疏水性强、mRNA降解、或由于蛋白错误折叠而水解都可能造成表达水平低,可尝试不同的生长和表达条件来提高融合蛋白的表达量,低温诱导可降低包含体的形成及避免水解;运用最适密码子可提高表达;也可能由于目的蛋白对宿主细胞有毒性而使克隆不稳定。

更新时间:2021-12-15

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厂商性质:生产厂家

生产地址:上海

   质粒菌株库常用菌株—览表
  BL21(DE3)该菌株用于高效表达克隆于有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。天然缺失外膜蛋白酶ompT和ATP依赖的蛋白酶Lon (La),利于异源蛋白的表达。在培养皿上的生长时间约为10小时左右。ER2566该菌株用于高效表达克隆于有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。在培养皿上的生长时间约为10小时左右。
  DH5a一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其80lacZIM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,即可以用于蓝白斑显示。该菌株也缺失多种蛋白酶,在培养皿上的生长时间约为12小时左右。
  JM101一种可支持带有琥珀突变的载体生长的宿主菌,在培养皿上的生长时间约为10小时左右。
  JM109一种带有琥珀突变的载体生长的重组缺陷的抑制型菌株,对转染的DNA有修饰作用但无限制作用,在培养上的生长时间约为10小时左右。
  HB101一种通常用于大规模制备质粒的抑制型菌株,它是一种转化效率很高的大肠杆菌K12×大肠杆菌B的杂交菌株,在培养皿上的生长时间约为10小时左右。

  常用原核表达质粒一览表
  质粒名称pRSET p24B11 pTYB pGEX pET pTRX-Fus pBV pMAL实验室系列数31462122启动子T7T7T7 PtacT7 PLPL Ptac大小(Kb)2.95.47.34.94.73.5/6.7抗性标记Ap Kan ApAp Kan ApAp Ap融合蛋白大小(kD)3-5 kD 0-1 kD 55 kD 26 kD 3-4 kD 11 kD/43 kD诱导物IPTG IPTG IPTG IPTG IPTG Trp 420C IPTG
  如何提高目的蛋白在大肠杆菌中的表达量及可溶性表达?如何防止目的蛋白的降解?
  融合蛋白的表达水平主要受目的蛋白影响、密码子不适、疏水性强、mRNA降解、或由于蛋白错误折叠而水解都可能造成表达水平低,可尝试不同的生长和表达条件来提高融合蛋白的表达量,低温诱导可降低包含体的形成及避免水解;运用最适密码子可提高表达;也可能由于目的蛋白对宿主细胞有毒性而使克隆不稳定。故表达时可利用丰富的培养基、新鲜的单菌落、低温诱导、低浓度的IPTG、减少诱导时间等条件来提高蛋白及可溶性蛋白的产量。蛋白酶抑制剂,蛋白酶缺陷的工程菌或者低温诱导可防止目的蛋白降解,纯化时为防止降解可使用变性条件,如6M脲等。
  质粒菌株库pMAL纯化系统
  pMAL-p2为分泌型表达载体,表达的融合蛋白分布于大肠杆菌外周腔,用冷渗透法即可获得较纯的融合蛋白。pMAL-c2表达的可溶性融合蛋白多位于大肠杆菌细胞质中,可按常规方法进行纯化。二者均为Ptac启动子,大小约为6.7Kb,不同的是pMAL-c2无malE信号序列。
  大肠编辑质粒 pRE112/X7213
  大肠编辑质粒 pKD46
  大肠编辑质粒 pCP20
  大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pwtCas9-bacteria #44250
  大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pC001-huLshC2C2-MBP 79150
  大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCas9 #42876
  大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCAS #62225
  大肠编辑质粒 pCAS配套质粒 pTargetF #62226
  大肠编辑质粒 大肠Cas9质粒 pCRISPR #42875
  哺乳编辑质粒
  哺乳编辑质粒 pX260 #42229
  哺乳编辑质粒 pX330 #42230
  哺乳编辑质粒 pX335 #42335
  哺乳编辑质粒 pX458 #48138
  哺乳编辑质粒 pX459 #48139
  哺乳编辑质粒 pX458M(+EZ-GuideXH)
  哺乳编辑质粒 pX459M(+EZ-GuideXH)
  EZ-GuideXH
  哺乳编辑质粒 pX461 #48140
  哺乳编辑质粒 pX552 #60958
  哺乳编辑质粒 pX601 #61591
  哺乳编辑质粒 pX602 #61593
  哺乳编辑质粒 LentiCRISPR V2 #52961
  哺乳编辑质粒 pLenti dCasVP64-Blast #61425
  哺乳编辑质粒 pDD162 (Peft-3::Cas9 + Empty sgRNA) #47549
  哺乳编辑质粒 pmCherry-C1-EGFP(CRISPR验证质粒)
  哺乳编辑质粒 pY010 (pcDNA3.1-hAsCpf1) #69982
  哺乳编辑质粒 addgene53189 ph7SK-gRNA
  哺乳编辑质粒 pJ23sgRNA-eGFP 3
  编辑质粒 酵母 Cas9-NAT酵母 #64329
  编辑质粒 酵母 Cas9-NAT-kan酵母
  编辑质粒 pdCas9-Tet1-CD #83340
  哺乳报告基因质粒 pGL3-Basic
  哺乳报告基因质粒 pGL3-Promoter
  哺乳报告基因质粒 pGL3-enhancer
  哺乳报告基因质粒 pGL3-Control
  哺乳报告基因质粒 pRL-TK
  哺乳报告基因质粒 pRL-SV40
  哺乳报告基因质粒 pGL4.10[luc2]
  哺乳报告基因质粒 pGL4.18[luc2PNeo]
  自噬相关质粒 ptfhLC3B人
  自噬相关质粒 ptfLC3大鼠
  自噬相关质粒 HH-plasmid A1 pCDNA3.1(+)-3HA-hLC3B人
  自噬相关质粒 慢病毒 plvx-GFP-LC3人
  自噬相关质粒 HH-plasmid A1 pCDNA3.1(+)-hLC3B人
  自噬相关质粒 pEGFP-LC3人
  自噬相关质粒
  自噬相关质粒
  哺乳表达质粒 pCDNA3.0
  哺乳表达质粒 pIRES2-zsGreen1
  哺乳表达质粒 pTRACER-CMV3
  哺乳表达质粒 pVAX1
  哺乳表达质粒 pCEP4
  哺乳表达质粒 pCEP4-CAT
  哺乳表达质粒 pBudCE4.1
  哺乳表达质粒 pBudCE4.1/lacZ/CAT
  哺乳表达质粒 pTagBFP-N vector
  哺乳表达质粒 p3XFLAG-CMV-7.1
  哺乳表达质粒 pCS2 Notch1 Full Length-6MT(Plasmid #41728)
  哺乳表达质粒 pMy-BirA-T2A-eGFP
  哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-bFosVC155
  哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-bJunVN173
  哺乳表达质粒 荧光共振能量转移 pBIFC-VC155
  哺乳表达质粒 pBIFC-CC155
  哺乳表达质粒 细胞自噬 pEGFP-LC3人
  哺乳表达质粒 pCI-neo-GFP
  哺乳表达质粒 pEYFP-Actin
  哺乳表达质粒 FLAG-CMV-6a
  哺乳表达质粒 pDsReD1-C1
  大肠表达质粒 pGEX-4T-2
  大肠表达质粒 pGEX-4T-3
  大肠表达质粒 pKK233-2
  大肠表达质粒 pSR43.6r
  大肠表达质粒 pWUR702 53079
  逆转录类质粒 逆病毒载体 pBABE-HA-puro
  逆转录类质粒 逆病毒载体,荧光素酶 pBABE-LUC+
  逆转录类质粒 逆转录病毒载体,LCNRNA LZRS-HOTAIR
  逆转录类质粒 逆转录病毒载体,对照 LZRS-control
  逆转录类质粒 逆转录病毒载体 pLEGFP-N1

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