注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 的 1*TE缓冲液来溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒
| pGEM-HE蛋白表达质粒 |
| pDC316-ZsGreen1-CD274-shRNA1基因沉默质粒 |
| pDrive基因模板质粒 |
| pET23b-Tac-NDH2蛋白表达质粒 |
| pTOPO-Zdhhc24-r基因模板质粒 |
| pLKO.1-eIF3a-shRNA1基因沉默质粒 |
| pLKO.1-FTO-shRNA1基因沉默质粒 |
| pLKO.1-EIF4E-shRNA1基因沉默质粒 |
| pLKO.1-METTL14-shRNA1基因沉默质粒 |
| pLKO.1-EGFP-Puro-K2A-shRNA1基因沉默质粒 |
王晓
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