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Nme2sgRNA_pLKO基因编辑质粒

Nme2sgRNA_pLKO基因编辑质粒

简要描述:
Nme2sgRNA_pLKO基因编辑质粒
别名Plasmid #119926
启动子U6
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培养条件37℃
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途基因编辑
原核抗性氨苄青霉素
真核抗性嘌呤霉素

更新时间:2021-06-21

访问量:28

厂商性质:生产厂家

生产地址:上海

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

442热激90s,再冰浴2min

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

66000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

pBARGPE1-Pyrg-EGFP蛋白表达质粒
pUC57-Kan基因模板质粒
pUC57-Simple基因模板质粒
pCS2+蛋白表达质粒
pLKO.1-DDit3-shRNA1基因沉默质粒
pT7-MS2基因模板质粒
pUC18-TMV基因模板质粒
pMCSG9蛋白表达质粒
pKK223-3蛋白表达质粒

 

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