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pET20b-T7-MCS-2×Linker-mCherry-6×His质粒

pET20b-T7-MCS-2×Linker-mCherry-6×His质粒

简要描述:
pET20b-T7-MCS-2×Linker-mCherry-6×His质粒
启动子T7
复制子pBR322
克隆菌株DH5a
培养条件37度
载体宿主大肠杆菌
载体用途蛋白表达
基因种属空载体
基因类型ORF
原核抗性Amp
荧光蛋白红色

更新时间:2021-06-21

访问量:28

厂商性质:生产厂家

生产地址:上海

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

442热激90s,再冰浴2min

5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

66000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

pLVshRNA-U6-MGLL(human)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默质粒
pA7-GFP蛋白表达质粒
pET20b-T7-MCS-2×Linker-mCherry-6×His蛋白表达质粒
pLVX-EF1α-IRES-Neo蛋白表达质粒
pCDH-CAG-MCS-EF1-Puro蛋白表达质粒
pLKO.1-U6-VPS72(human)-shRNA3-hPGK-EGFP基因沉默质粒
pCDH-U6-shRNA-EF1-Puro基因沉默质粒
pLVX-U6-Golph3(mouse)-shRNA3-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默质粒
pLKO.1-U6-GPX4(human)-shRNA2-CMV-EGFP-hPGK-Puro基因沉默质粒
pLVX-U6-Golph3(mouse)-shRNA1-PGK-EGFP-E2A-Puro基因沉默质粒

 

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