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pCMV-EGFP-Ppp3cc(mouse)-Neo
  • 产品型号:P68086
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-05-21
  • 访  问  量:32
简要描述:

名称pCMV-EGFP-Ppp3cc(mouse)-Neo
别称NM_001304991.2;Calnc; PP2BA gamma
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途蛋白表达

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产品详情

名称pCMV-EGFP-Ppp3cc(mouse)-Neo
别称NM_001304991.2;Calnc; PP2BA gamma
基因长1569bp
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途蛋白表达
片段类型ORF
片段物种小鼠
原核抗性Amp
筛选标记Neo/G418
荧光标记绿色
启动子CMV
复制子pUC
感受态DH5a
温度37度
背景载体pCMV-EGFP-3×Linker-MCS-Neo
正向引物pEGFP-C-5'

 


注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

4
42热激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒


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