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pETcon(-)酵母表达质粒
  • 产品型号:货号:P7956
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-06-09
  • 访  问  量:66
简要描述:

酵母表达质粒挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

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产品详情

别名:酵母表达质粒Plasmid #41522

启动子:T7

原核抗性:Amp

真核抗性:TRP1

克隆菌株:DH5α

培养条件:37℃

质粒宿主:酵母菌

质粒用途:蛋白表达

原核抗性:氨苄青霉素

真核抗性:TRP1 

 

注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min

4
42热激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒

 

 
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