名称pCYP7A1(human)-Fluc-SV40-hRluc-Neo
别称-
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途启动子检测

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名称	pCYP7A1(human)-Fluc-SV40-hRluc-Neo
别称	-
基因长	2001bp
质粒宿主	哺乳细胞
质粒用途	启动子检测
片段类型	Promoter
片段物种	人
原核抗性	Amp
筛选标记	Neo/G418
荧光标记	Fluc,Rluc
启动子	CYP7A1
复制子	pUC
感受态	DH5a
温度	37度
背景载体	pMCS-Fluc-SV40-hRluc-Neo
正向引物	cer region-F1

注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。

1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0 的 1*TE缓冲液来溶解质粒，室温放置1min；

2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

4、42℃热激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒

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