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稳转株构建时转染方法的选择解答

  • 发布日期:2021-07-05      浏览次数:53
    •    稳转株即稳定表达细胞株,指基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。
        稳转株构建过程中转染是一个很关键的过程,转染就是在真核细胞里导入具有生物功能的核酸,并在细胞中维持其生物功能。转染可谓是做生物学实验的大家经常会考虑的一项实验技术,大致原理也都明白。实验室实验时若qpcr验证的结果一直不行,可能就是转染效率太低以至于无法进行后续的实验。到底转染是什么呢,为如何选择转染方法我们就来一探究竟吧!
        稳转株构建转染方法的选择:
        我们熟知且常用的转染方法主要有物理介导、化学介导、生物介导。但实验室使用较多的主要有化学介导中的脂质体转染(质粒转染)和生物介导中的慢病毒转染法。其中质粒转染操作简单,一般瞬时转染选择较多,但有些细胞系不容易转染,因此选择转染方式时一定要做足功课。千万不要图方便,否则转染效率简直崩溃。特别是养原代细胞的小伙伴,一点要认真选择!
        病毒转染一般具有能够稳定表达的优势,且其对原代细胞有较高的转染效率,其中更分为慢病毒转染,逆转录病毒转染和腺病毒转染,其中腺病毒转染可适合更为难转染的细胞,例如悬浮细胞、T细胞、raw细胞等难转染细胞。
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